C18色谱柱的详细分析
2023-03-13
C18色谱柱是反相液相色谱的核心耗材，键合相为十八烷基硅烷，通过疏水作用分离非极性至中等极性化合物。
一、结构特性
1.硅胶基质：高纯度多孔硅胶；
2.键合相：单层键合密度1.8–3.0μmol/m²；
3.封端处理：三甲基氯硅烷封闭游离硅羟基，减少碱性物拖尾；
4.pH耐受：标准柱pH2–8，杂化硅胶柱可耐受pH1–12。
二、分离机制与优势
疏水作用力主导：溶质烷基链与C18链间疏水吸附（k值随溶质疏水性↑而↑）
关键优势：
耐受有机相（甲醇/乙腈梯度洗脱）
分离多肽、药物、环境污染物等复杂样品
高载样量（10mg/g填料）
三、应用场景
1.制药：小分子药物、代谢物；
2.生物分析：多肽、蛋白质酶解片段；
3.环境：PAHs、农药残留；
4.食品：脂溶性维生素、添加剂。
四、选型关键
1.粒径：1.8–2.7μm；3–5μm；
2.孔径：小分子选100Å，大分子选300Å；
3.特殊需求：碱性物用二次封端柱，高pH样品用杂化颗粒柱。
五、使用与维护
柱寿命延长技巧：
流动相过滤（0.22μm膜）
进样前离心/过滤样品（防堵筛板）
避免>60℃高温或强酸强碱条件（pH<2或>10）
再生流程：
乙腈冲洗→0.1MH₃PO₄冲洗→乙腈保存
